【摘 要】
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目的:建立成年SD大鼠背根神经节神经元的分离和培养的方法,并探索胶原酶的最佳消化时间。方法:取成年Sprague-Dawley(SD)大鼠的背根神经节(Dorsal Root Ganglion,DRG),经0.5%
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目的:建立成年SD大鼠背根神经节神经元的分离和培养的方法,并探索胶原酶的最佳消化时间。方法:取成年Sprague-Dawley(SD)大鼠的背根神经节(Dorsal Root Ganglion,DRG),经0.5%的胶原酶Ⅰ和0.05%胰酶消化后,接种到多聚赖氨酸包被的细胞培养板中;4 d后传代并用差速贴壁法纯化神经元细胞;采用神经元特异性烯醇化酶(Neuron-specific Enolase,NSE)免疫组化试剂盒进行鉴定,并计算细胞纯度;分别用胶原酶作用1h、24 h和48 h来探索胶原酶消化的最佳时间。结果:培养的DRGs生长状态良好,传代一次后杂细胞多数被去除,神经元的纯度可达到(94.28±1.87)%,贴壁的DRG神经元可存活2至3周。结论:成功建立成年SD大鼠DRG神经元原代培养体系,该体系可获得生长状态良好、纯度较高的DRG神经元细胞。
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