HPLC法同时测定大鼠尿样中秦皮甲素和秦皮乙素的浓度

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目的建立高效液相色谱(HPLC)法同时测定大鼠尿液中秦皮甲素与秦皮乙素含量的方法。方法取SD大鼠6只,灌胃给予秦皮甲素(66.6mg/kg)和秦皮乙素(77.4mg/kg)后,分别收集0~1、1~3、3~6、6~10、10~24、24~36、36~48h等不同时间段的尿液,固相萃取处理尿样,HPLC色谱柱为Shim-pack VP-ODS柱(250mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.2%甲酸(13∶87),流速为1.0 mL/min,柱温为35℃,检测波长为339nm,测定秦皮甲素和秦皮乙素浓度并采用3P87药代动力学程序计算药动学参数。结果秦皮甲素与秦皮乙素在0.1~10.0μg/mL线性良好(r分别为0.998 5和0.999 1),提取回收率均大于70%,高、中、低浓度秦皮甲素和秦皮乙素的日内和日间精密度RSD均小于10%,秦皮乙素48h累积尿药排泄量大于秦皮甲素。结论该方法灵敏、准确、简单,可以为秦皮甲素和秦皮乙素在生物体内的代谢和临床用药提供参考。
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