【摘 要】
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目的 通过RNA干扰(RNAi)沉默特异性核基质结合区结合蛋白-1(SATB1)基因的表达,观察对前列腺癌DU145细胞增殖及侵袭力的影响.方法 构建SATB1基因特异性短发卡RNA(shRNA)表达载体pGPH1/GFP/Neo-SATB1,用LipofectamineTM 2000将pGPH1/GFP/Neo-SATB1转染人前列腺癌DU145细胞,以空质粒pGPH1/GFP/Neo及未转染的
【机 构】
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目的 通过RNA干扰(RNAi)沉默特异性核基质结合区结合蛋白-1(SATB1)基因的表达,观察对前列腺癌DU145细胞增殖及侵袭力的影响.方法 构建SATB1基因特异性短发卡RNA(shRNA)表达载体pGPH1/GFP/Neo-SATB1,用LipofectamineTM 2000将pGPH1/GFP/Neo-SATB1转染人前列腺癌DU145细胞,以空质粒pGPH1/GFP/Neo及未转染的细胞作对照.在转染后24、48、72 h收集样本,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测SATB1 mRNA表达、噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞的增殖、Transwell实验检测细胞的侵袭能力.结果 PCR及测序鉴定表明质粒pG PH1/GFP/ Neo-SATB1构建成功.转染pGPH1/GFP/Neo-SATB124、48、72 h后,DU145细胞SATB1 mRNA表达水平为(53.0±4.0)％、(49.3±3.1)％、(34.1±4.3)％,MTT表明:pGPH1/GFP/Neo-SATB1组细胞增殖抑制率均显著低于空质粒组、未转染细胞组；Transwell侵袭实验结果显示,转染pGPH1/GFP/Neo-SATB1组侵袭细胞数为34.2±4.2,显著低于两对照组(P＜0.05).结论 靶向SATB1基因的RNA干扰可抑制前列腺癌DU145细胞增殖和侵袭力。
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