探讨姜黄素通过Wnt/β-catenin信号通路对胶质瘤细胞的增殖及凋亡影响。

研究对象为人胶质母细胞瘤U251细胞系，实验分为空白对照组和姜黄素实验组(实验浓度分别为10 μmol/L和20 μmol/L)。细胞毒性实验研究姜黄素对U251胶质瘤的细胞毒性作用。四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法观察增殖能力；Caspase-3活性检测及流式细胞仪(FCM)实验检测细胞凋亡；流式细胞术检测细胞周期；实时定量PCR、Western-blot和免疫荧光检测法检测细胞内的β-catenin、c-myc表达水平。荧光素酶实验检测姜黄素作用后Wnt/β-catenin通路活性改变。

随着姜黄素作用浓度的增加，U251胶质瘤细胞的细胞毒性增强，在姜黄素实验组中，当浓度为5、10、20、和40 μmol/L时，细胞活性分别为(88.55±2.35)%、(62.78±3.35)%、(35.17±2.05)%和(7.47±1.92)% (P<0.05)，并且增殖抑制作用明显增强，测得姜黄素作用24h的IC50为16.32 μmol/L，故姜黄素实验组浓度选用10 μmol/L和20 μmol/L；实验组(10 μmol/L和20 μmol/L) Caspase-3的相对活性分别为(3.64±1.49)%，(5.41±0.36)%，与对照组(0.91±0.62)%相比，明显增强(P<0.05)；流式细胞术检测姜黄素作用48 h后，实验组U251细胞凋亡率分别为(14.7±2.21)%和(35.6±1.37)%，与对照组凋亡率(0.5%±0.67)%相比，差异具有统计学意义(P<0.05)。流式细胞仪检测姜黄素可以阻滞细胞周期于G2/M期，对照组，及姜黄素实验组(10 μmol/L和20 μmol/L )的G2/M期分别为(7.52±3.84)%，(16.28±2.73)%，(25.47±5.61)%(P<0.05)；姜黄素作用于胶质瘤后β-catenin的mRNA水平下降，荧光定量PCR检测结果为(93.87±5.73)%，(68.83±7.67)%和(47.46±8.52)% (P<0.05),差异具有统计学意义。Western-blot实验显示β-catenin和c-myc蛋白表达水平均下降；免疫荧光实验发现姜黄素可以抑制β-catenin进入细胞核，同时减少其复合物的形成。荧光素酶实验显示姜黄素作用胶质瘤细胞后，Wnt/β-catenin通路活性明显受到抑制(P<0.01)。

姜黄素可能通过下调Wnt/β-catenin通路抑制胶质瘤细胞增殖并促进凋亡。