【摘 要】
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目的探讨曲古抑菌素(trichostatin A,TSA)对大鼠骨髓间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells,MSCs)特化为成骨细胞的影响。方法采用全骨髓贴壁法体外分离、培养、纯化大
【机 构】
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景德镇市第一人民医院骨科,上海长征医院脊柱外科,浙江省立同德医院骨科
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目的探讨曲古抑菌素(trichostatin A,TSA)对大鼠骨髓间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells,MSCs)特化为成骨细胞的影响。方法采用全骨髓贴壁法体外分离、培养、纯化大鼠MSCs,进行形态学观察;选择第3代MSCs定向诱导分化为成骨细胞,根据给药浓度不同分为TSA低剂量组(0.1μmol/L)、中剂量组(1μmol/L)、高剂量组(10μmol/L),同时设立空白对照组。MTT法观察各组对MSCs的增殖作用并绘制细胞生长曲线,检测TSA对MSCs诱导分化为成骨细胞过程中碱性磷酸酶(alkaliphosphatase,ALP)活性的影响;RT-PCR法检测TSA对核心结合因子α-1(corebinding factorα1,Cbfα1)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,b FGF)、胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factors-1,IGF-1)mRNA表达水平的影响。结果 MSCs生长曲线的测定结果显示,各组细胞生长曲线趋势相似,与对照组相比,TSA低剂量组的生长曲线没有显著性变化,TSA中剂量及高剂量均显著促进MSCs增殖(P<0.05)。与对照组相比,TSA低剂量组、中剂量组、高剂量组对MSCs诱导分化为成骨细胞过程中的第4、5、6 E均可显著提高ALP活性(P<0.05)。与空白组相比,TSA各剂量组可以显著提高Cbfα1、b FGF、IGF-1mRNA表达水平(P<0.05)。结论TSA可显著促进大鼠骨髓间充质干细胞特化为成骨细胞,可能是通过上调Cbfα1、b FGF、IGF-1基因的表达水平实现。
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