人膜联蛋白V的原核表达和鉴定

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目的构建人膜联蛋白V的原核表达载体并诱导其表达.方法利用RT-PCR技术从人胎盘组织总RNA扩增膜联蛋白V基因的编码序列,将扩增产物克隆至GST融合表达载体pGEX-2T,以IPTG诱导GST融合人膜联蛋白V的表达.结果凝胶电泳显示人胎盘组织RT-PCR扩增产物的分子量大小与目的片段大小相符.对重组质粒分析表明,插入片段的序列与发表的人膜联蛋白V基因编码序列一致.在IPTG的诱导下,BL21重组菌高效表达出一个分子量约为61kDa产物.结论人膜联蛋白V编码序列已被克隆至GST融合表达载体pGEX-2T.
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