论文部分内容阅读
目的 探讨Racl基因沉默后对结直肠癌LoVo细胞侵袭移动的影响.方法 逆转录PCR和Western印迹法检测Racl mRNA和Racl蛋白在结直肠癌细胞株LoVo、SW480、SW620、SW1116、HT29中的表达.通过转染Racl-shRNA观察Racl基因沉默后LoVo细胞骨架的变化.再转染Rael-N17和Racl-L61,观察Rael基因缺失和表达增强后对LoVo细胞侵袭移动的影响.结果 Rael mRNA和蛋白在结直肠癌细胞株中均高表达.Racl基因沉默后LoVo细胞交联的纤维状肌动蛋白(F-actin)网和细胞膜伪足形成减少.细胞迁移实验显示,Racl-shRNA组细胞迁移数为(75±5)个、Racl-N17组为(93±5)个、Racl-L61组为(267±7)个、对照组为(214±8)个,Racl-shRNA、Racl-N17组与对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.01),Racl-L61组与对照组比较差异亦有统计学意义(P＜0.05).在细胞侵袭试验中.Rael-shRNA组细胞迁移数为(35±5)个、Racl-N17为(42±5)个、Racl-L61为(86±7)个、对照组为(73±6)个,Racl-shRNA、Racl-N17组与对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.01).Racl-L61组与对照组比较差异亦有统计学意义(P＜0.05).结论 RNA干扰沉默Racl基因后影响了LoVo细胞肌动蛋白细胞骨架的形成.同时抑制了LoVo细胞移动和侵袭特性。