以大肠埃希氏菌肽脱甲酰基酶为靶点的高通量筛选模型的建立

来源 :中国抗生素杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：ceng0606

【摘要】

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本文用PCR法从大肠埃希氏菌K-12中克隆出肽脱甲酰基酶(peptide deformylase,PDF)基因,通过测序确证与文献报道的pdf基因序列完全一致.将pdf连接到原核蛋白表达载体pET-30-a(+

【作者】

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唐先兵司书毅张月琴

【机构】

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中国医学医学院

【出处】

：

中国抗生素杂志

【发表日期】

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2003年10期

【关键词】

：

肽脱甲酰基酶高通量筛选模型放线酰胺素 Peptide deformylase High throughput screenmodel Actinonin

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本文用PCR法从大肠埃希氏菌K-12中克隆出肽脱甲酰基酶(peptide deformylase,PDF)基因,通过测序确证与文献报道的pdf基因序列完全一致.将pdf连接到原核蛋白表达载体pET-30-a(+)上,并转化到大肠埃希氏菌BL21(DE3)菌株中,IPTG诱导表达.过量表达的PDF酶用Q Sepharose HP离子交换柱和Superdex 75纯化得到高纯度Ni-PDF.应用荧光测试仪PolarFluostar检测PDF对底物For-Met-Ala-Ser的水解活性,PDF酶的已知抑制剂放

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