冬虫夏草cDNA文库的构建和鉴定

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目的分别构建冬虫夏草子座和虫体部分的cDNA文库。方法裂解法提取总RNA,磁珠法分离mRNA,反转录合成双链cDNA,末端补平,连接EcoRⅠ并磷酸化,胶回收目的片断,连接载体pBluescript ⅡsK(+)xR并电转化感受态细胞DH10B,测定丈库的克隆数、重组率,PCR测定插入片断大小。结果所建丈库库容量分别为:子座部分1.0×10^6克隆、虫体部分1.28×10^6克隆;重组率分别为:子座部分87.5%、虫体部分68.75%,片段的大小范围均在0.5~2kb之间。结论分别构建
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