【摘 要】
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目的应用组织块与混合酶消化联合使用进行大鼠颅骨成骨细胞体外培养.方法取新生2～3 d的SD大鼠颅骨剪碎依次用不同浓度的胰蛋白酶和Ⅱ型胶原酶混合分2次对颅骨进行消化.纯化、
【机 构】
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第四军医大学西京医院全军骨科研究所,解放军160医院骨科
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目的应用组织块与混合酶消化联合使用进行大鼠颅骨成骨细胞体外培养.方法取新生2～3 d的SD大鼠颅骨剪碎依次用不同浓度的胰蛋白酶和Ⅱ型胶原酶混合分2次对颅骨进行消化.纯化、接种后进行原代和传代培养并对细胞进行鉴定.结果原代培养的细胞ALP染色阳性区域可以达90%以上,传代培养后细胞阳性率为100%.18 d左右有钙结节形成.电镜观察示细胞表面有微绒毛,粗面内质网丰富.原代培养细胞BMP免疫组化呈弱阳性表达,传代培养后细胞BMP表达逐渐增强,以第5代左右细胞表达强度最高.结论改良组织块混合酶消化法成骨细胞培养
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