目的:探讨lncRNA POU3F3通过调节MGMT的表达影响高级别脑胶质瘤细胞对替莫唑胺（temozolomide,TMZ）耐药及其作用机制。方法:选取2016年1月至2018年1月北京大学国际医院神经外科收治的60例患者组织标本,其中,脑外伤患者12例（正常组）、初发高级别脑胶质瘤患者30例（初发组）、复发高级别脑胶质瘤患者[复发组,已经接受了手术治疗+TMZ综合治疗再次复发的人群]18例。采用1、2、4及8μg/ml TMZ诱导U251细胞并维持正常生长1周以构建抵抗U251 TMZ耐药细胞系（U251 TMZ-resistance,U251-TR）;正常组采用相同体积的0.9%生理盐水处理U251细胞。采用qPCR和Wb检测正常脑组织及神经胶质瘤细胞中POU3F3和甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶（methylguanine DNA methyltransferase,MGMT）mRNA和蛋白的表达水平。慢病毒转染构建稳定干扰POU3F3的U251-TR细胞系（U251-TR stable interference POU3F3,U251-TR siPOU3F3）,MTT法验证U251-TR细胞并检测细胞TMZ IC50值,Wb检测细胞中MGMT蛋白的表达水平。结果:与正常组及初发组比较,复发组POU3F3表达显著增高（P<0.01）,U251-TR细胞TMZ IC50值显著高于U251细胞（P<0.01）,U251-TR siPOU3F3细胞TMZIC₅0值显著低于U251-TR细胞（均P<0.01）,但高于U251细胞（P<0.01）;U251-TR细胞POU3F3及MGMT mRNA和蛋白的表达水平均高于U251细胞（均P<0.01）,U251-TR siPOU3F3细胞POU3F3及MGMT mRNA和蛋白表达水平均低于U251-TR细胞（均P<0.01）。结论:lncRNA POU3F3是促进高级别脑胶质瘤细胞TMZ耐药性的关键因素,可能对临床上TMZ耐药的研究有一定的意义。