栝楼桂枝颗粒对脑缺血再灌注损伤模型大鼠缺血区脑组织内质网应激及细胞凋亡的影响

来源 :中医杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ganglei2008
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目的探讨栝楼桂枝颗粒治疗脑缺血再灌注损伤的可能作用机制。方法 54只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、栝楼桂枝颗粒组,每组18只。模型组、栝楼桂枝颗粒组大鼠采用线栓法致大脑中动脉栓塞建立脑缺血再灌注损伤模型,假手术组除不插入线栓外其余操作同模型组。各组于造模后2 h开始干预,假手术组和模型组给予生理盐水10 ml/kg灌胃,栝楼桂枝颗粒组给予栝楼桂枝汤颗粒剂3.6 g/(kg·d)灌胃。各组均每日1次,连续7天。采用改良的神经功能缺损评分(mNSS)、转角实验对大鼠神经损害程度进行评价;采用TUNEL法检测大鼠缺血区脑组织细胞凋亡情况,采用Western blot法检测脑组织中Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、神经元特异核蛋白(NeuN)的相对表达量;Real-Time PCR法检测缺血区脑组织内质网应激相关因子真核生物起始因子2α(elF2α)、蛋白激酶RNA样内质网激酶(PERK)、内质网源性转录因子(CHOP)、转录激活因子4(ATF4)、葡萄糖调节蛋白78 (GRP78)的mRNA表达;Western blot法检测缺血区脑组织ATF4、CHOP、PERK、elF2α、磷酸化真核生物起始因子2α抗体(p-elF2α)、磷酸化蛋白激酶RNA样内质网激酶(p-PERK)蛋白的表达水平。结果与假手术组比较,模型组大鼠mNSS评分、转角百分率升高,缺血区脑组织细胞凋亡率、Bax蛋白表达升高,Bcl-2及NeuN蛋白表达降低(P<0.01);缺血区脑组织中GRP78、PERK、eIF2α、CHOP、ATF4 mRNA升高,CHOP、ATF4蛋白表达及p-PERK/PERK、p-eIF2α/eIF2α值亦升高(P<0.01)。与模型组比较,栝楼桂枝颗粒组大鼠上述各指标均明显改善(P<0.05或P<0.01)。结论栝楼桂枝颗粒可通过抑制内质网应激,从而抑制脑缺血损伤后神经细胞凋亡,进而发挥抗脑缺血再灌注损伤作用。
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