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目的
观察早期注射骨髓间充质干细胞(BMSCs)对制动大鼠骨骼肌细胞Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。
方法取幼龄大鼠(80~100 g)胫骨和股骨,分离培养大鼠BMSCs。用可塑性石膏制备右下肢管型固定肌萎缩模型,根据随机数字表法将24只大鼠分成假手术组、干细胞组、磷酸缓冲液(PBS)组,干细胞组大鼠下肢制动48 h后于比目鱼肌局部多点注射1×106个BMSCs;PBS组大鼠下肢制动48 h后注射等量PBS;假手术组大鼠下肢包裹相同重量石膏且不限制关节活动,48 h后注射等量PBS,14 d后各组大鼠拆除石膏取标本分析。
结果培养中的大鼠BMSCs以梭形细胞为主,呈放射状排列的细胞集落,细胞生长旺盛,可连续稳定传代10代以上。实验中第4代BMSCs表面标志CD44、CD90均呈阳性表达,阳性率分别为95.84%、96.00%,而CD34、CD45阳性率极低。与假手术组大鼠比目鱼肌中Bax和Bcl-2蛋白表达量[(0.14±0.11)、(0.81±0.06)]比较,干细胞组和PBS组Bax蛋白表达量[(0.41±0.08)、(0.63±0.10)]明显升高,两组Bcl-2蛋白表达量[(0.47±0.14)、(0.22±0.13)]明显降低;干细胞组中Bax蛋白的表达水平较PBS组低,Bcl-2蛋白的表达水平显著增高,差异有明显统计学意义(P<0.05)。
结论制动大鼠骨骼肌早期注射BMSCs,可引起抗凋亡蛋白Bcl-2表达水平上调、促凋亡蛋白Bax表达水平下调。