人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的克隆及在毕赤酵母中的表达

来源 :中国生物工程杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wuyouan321
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采用加长引物5’端的方法克隆了hGM-CSF的编码基因,克隆过程中对该基因的局部做了密码子优化。然后克隆进毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K,电击转化毕赤酵母。PCR、SDS-PAGE与Western blotting证实hGM-CSF已整合进酵母基因组,摇瓶水平粗蛋白表达量达389mg/L,动物实验证实蛋白产物活性正常,SDS-PAGE与N-糖苷酶F去糖基化分析发现hGM-CSF被糖基化。
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