【目的】研究探索不含佛波酯、霍乱毒素条件下小儿正常表皮黑素细胞培养与扩增技术,鉴定黑素细胞合成黑素与产生表面抗原的功能,为开展小儿白癜风以及先天性表皮色素减退等疾病的细胞移植治疗提供可靠的实验依据。【方法】获取15例正常儿童的皮肤组织,分离提取黑素细胞,应用M2培养基并添加bFGF进行黑素细胞培养与增殖,采用DOPA染色法、黑素细胞表面抗原(MART-1)荧光特异性抗体结合实验鉴定体外培养黑素细胞的细胞纯度、合成黑素与表达细胞表面抗原的生物学功能。【结果】15例健康儿童自体黑素细胞培养成功率为100%,未见成纤维细胞、角质形成细胞污染,增殖培养3～5代后的细胞数量即可达到移植要求数量级(8～10)万/cm2,并可连续传平均20代。黑素细胞DOPA染色阳性,浓度均匀,纯度高,并可与特异性MART-1抗体相结合。【结论】应用M2培养基在不添加佛波酯、霍乱毒素条件下进行的黑素细胞增殖培养,获得的黑素细胞生长状态、细胞数量比较理想,黑素细胞具有合成黑素的能力,能成功表达黑素细胞表面抗原。