【摘 要】
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目的 研究家蝇幼虫抗菌肽对弓形虫的杀伤作用. 方法 通过研磨、高速离心和层析分离家蝇幼虫抗菌肽,暂命名为AMP-1.将AMP-1用PBS调整浓度为12.5、25.0和50.0 μg/ml,分别作用于体外游离的和Vero细胞内的弓形虫速殖子,采用MTT法和瑞姬氏染色法观察其24、48和72h的抑制率,并采用MTT法观察其对宿主细胞的毒性作用.将50 μg/ml的家蝇幼虫抗菌肽作用于体外游离的弓形虫速
【机 构】
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810007西宁,青海省疾病预防控制中心,810007西宁,青海省疾病预防控制中心,030001太原,山西医科大学寄生虫学教研室
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目的 研究家蝇幼虫抗菌肽对弓形虫的杀伤作用. 方法 通过研磨、高速离心和层析分离家蝇幼虫抗菌肽,暂命名为AMP-1.将AMP-1用PBS调整浓度为12.5、25.0和50.0 μg/ml,分别作用于体外游离的和Vero细胞内的弓形虫速殖子,采用MTT法和瑞姬氏染色法观察其24、48和72h的抑制率,并采用MTT法观察其对宿主细胞的毒性作用.将50 μg/ml的家蝇幼虫抗菌肽作用于体外游离的弓形虫速殖子24h后,采用透射电镜观察弓形虫速殖子超微结构的变化. 结果 研究发现,AMP-1的抗游离弓形虫作用随着浓度的增大和时间的延长而升高(F24h=23.482,F48h=20.519,F72h=9.469,P<0.05).瑞姬氏染色结果显示,各浓度抗菌肽组弓形虫对Vero细胞的侵入率均随着AMP-1浓度的增大而减小(F24h=8.888,F48h=10.890,P<0.05).12.5、25.0和50.0 μg/ml AMP-1作用于Vero细胞72 h后,细胞存活率分别为94.04%,90.70%和81.94%.透射电镜观察表明,AMP-1能引起弓形虫速殖子细胞膜、胞内细胞器以及细胞核受损. 结论 AMP-1能有效杀伤弓形虫速殖子,并且对正常细胞损伤很小,提示AMP-1可作为抗弓形虫的候选药物。
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