评估氟对体外培养的人脑神经母细胞瘤细胞株(SH-SY5Y细胞)线粒体膜电位和线粒体融合蛋白1(Mfn1)、分裂蛋白1(Fis1)表达的影响。
方法在SH-SY5Y细胞中加入0.0(对照)、0.4、2.0、4.0 mmol/L氟化钠(NaF),培养6、12、24、48 h;利用线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1法)对SH-SY5Y细胞线粒体膜电位进行染色;使用蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测线粒体Mfn1和Fis1蛋白的表达。
结果NaF作用6、12、48 h时,与对照组(1.63 ± 0.18、1.13 ± 0.15、1.30 ± 0.02)比较,2.0、4.0 mmol/L NaF处理组SH-SY5Y细胞线粒体膜电位的红绿荧光比值(1.01 ± 0.10、0.80 ± 0.04,0.75 ± 0.13、0.62 ± 0.10,0.82 ± 0.01、0.56 ± 0.04)明显降低(P均< 0.05);NaF作用6、12、48 h时,与对照组(0.93 ± 0.03、1.05 ± 0.07、1.17 ± 0.04)比较,0.4、2.0、4.0 mmol/L NaF处理组Mfn1蛋白的表达(0.75 ± 0.02、0.65 ± 0.05、0.57 ± 0.06,0.83 ± 0.06、0.79 ± 0.06、0.69 ± 0.06,0.98 ± 0.05、0.73 ± 0.07、0.62 ± 0.09)明显降低(P均< 0.05);NaF作用12 h时,与对照组(0.90 ± 0.05)比较,2.0、4.0 mmol/L NaF处理组Fis1蛋白表达(1.14 ± 0.06,1.23 ± 0.06)明显升高(P均< 0.05)。
结论氟中毒损伤可引起神经细胞线粒体融合分裂水平改变并致线粒体膜电位下降,其改变可能与高氧化应激发病学说相关。