【摘 要】
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目的分析比较强直性脊柱炎(AS)患者与正常对照者之间蛋白酶体(proteasome)的基因表达及生物学功能的差异.方法用快速蛋白质液相色谱法(FPLC法)分别从10个HLA-B27阳性家族中的
【机 构】
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100029,北京,中日友好医院风湿免疫科
【基金项目】
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人事部留学回国人员科技活动择优基金
论文部分内容阅读
目的分析比较强直性脊柱炎(AS)患者与正常对照者之间蛋白酶体(proteasome)的基因表达及生物学功能的差异.方法用快速蛋白质液相色谱法(FPLC法)分别从10个HLA-B27阳性家族中的AS患者及正常对照者(同一级亲属)的B淋巴细胞系中制备和纯化蛋白酶体.用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)测定蛋白酶体基因的表达.用三氯乙酸(TCA)沉淀法测定不同的蛋白酶体对125I标记的HLA-B27的降解程度.结果 B27阳性家族中,AS患者与非AS对照者的B细胞内蛋白酶体亚单位LMP2 mRNA的表达差异无显著性,而LPM7和MECL1 mRNA的表达AS患者明显高于非AS对照者(P均＜0.000 1).经干扰素(IFN)-γ刺激培养后,非AS对照者的LMP2、LMP7和MECL1 mRNA的表达均显著增加(P值分别为0.007,＜0.000 1和＜0.000 1),而AS组这三种亚单位基因的表达增加均不明显.因此,在IFN-γ刺激下AS与非AS组蛋白酶体基因的表达差异无显著性.免疫印迹分析表明AS患者LMP7及MECL1蛋白水平的表达也明显高于非AS对照者,LMP2蛋白的表达两组无明显差别.AS患者蛋白酶体的糜蛋白酶样活性明显增强,对B27的降解作用明显强于非AS的蛋白酶体,孵育4 h时的平均降解率为81.8%,而非AS对照者的蛋白酶体的平均降解率为41.9%(P＜0.000 1).结论结果提示蛋白酶体亚单位基因的过度表达及生物学功能的亢进可能是导致HLA-B27阳性者AS发生和发展的重要因素之一.
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