【摘 要】
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目的探讨人脐带间充质干细胞(HUMSCs)向卵巢颗粒细胞(GCs)分化的可行性。方法通过骨形态发生蛋白4 (BMP4)预处理,联合人卵泡液和卵丘GCs诱导HUMSCs向卵巢GCs分化;以人GCs作为对照。免疫荧光法检测HUMSCs诱导分化前和诱导分化12 d卵泡刺激素受体(FSHR)的表达;Real-time PCR检测HUMSCs诱导分化前、后GCs特异性基因FSHR、抗苗勒管激素(AMH)、芳
【机 构】
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中国人民解放军联勤保障部队第901医院生殖医学中心,合肥 230031,中国人民解放军联勤保障部队第901医院生殖医学中心,合肥 230031,中国人民解放军联勤保障部队第901医院生殖医学中心,合肥
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目的探讨人脐带间充质干细胞(HUMSCs)向卵巢颗粒细胞(GCs)分化的可行性。
方法通过骨形态发生蛋白4 (BMP4)预处理,联合人卵泡液和卵丘GCs诱导HUMSCs向卵巢GCs分化;以人GCs作为对照。免疫荧光法检测HUMSCs诱导分化前和诱导分化12 d卵泡刺激素受体(FSHR)的表达;Real-time PCR检测HUMSCs诱导分化前、后GCs特异性基因FSHR、抗苗勒管激素(AMH)、芳香化酶19A1 (CYP19A1)及干细胞多能性相关基因OCT4的表达。
结果诱导前HUMSCs无绿色荧光标记的FSHR表达;诱导分化12 d后,细胞形态与贴壁生长的人GCs相近,可见绿色荧光标记的FSHR表达,但荧光信号弱于阳性对照组;OCT4表达水平显著下调(P<0.001),GCs特异性基因FSHR、AMH和CYP19A1基因表达水平均显著上调(P均<0.001),表明诱导分化后HUMSCs已失去干细胞特性,向GCs定向分化,并具备GCs的部分特性。
结论初步建立了HUMSCs向GCs分化的体外培养体系;HUMSCs在体外可成功诱导分化为GCs样细胞。
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