【摘 要】
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目的 从ERK/mTOR信号通路观察六味地黄丸对氧化应激状态下MC3T3-E1细胞自噬的影响，探讨其治疗绝经后骨质疏松症的作用机制。方法 用过氧化氢（H2O2）模拟氧化应激状态，六味地黄丸（LWDH）含药血清干预MC3T3-E1细胞，将细胞分为Model组（H2O2干预）、Blank组（空白血清）、LWDH组（LWDH含药血清）、Rap组（mTOR通路抑制剂）、U0126组（ERK通路抑制剂）、R
【机 构】
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福建省中医药科学院骨质疏松证候基因组学研究室
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（81873323）； 福建省自然科学基金项目（2020J01725,2022J01863）；
论文部分内容阅读
目的 从ERK/mTOR信号通路观察六味地黄丸对氧化应激状态下MC3T3-E1细胞自噬的影响，探讨其治疗绝经后骨质疏松症的作用机制。方法 用过氧化氢（H2O2）模拟氧化应激状态，六味地黄丸（LWDH）含药血清干预MC3T3-E1细胞，将细胞分为Model组（H2O2干预）、Blank组（空白血清）、LWDH组（LWDH含药血清）、Rap组（mTOR通路抑制剂）、U0126组（ERK通路抑制剂）、Rap+LWDH组（mTOR通路抑制剂、LWDH含药血清）、U0126+LWDH组（ERK通路抑制剂、LWDH含药血清）;以不做干预的Control组作为对照。通过细胞活性氧（reactive oxygen species, ROS）检测细胞ROS水平；检测自噬蛋白LC3B及ERK/mTOR信号通路相关蛋白mTOR、p-mTOR、ERK1/2和p-ERK1/2的表达。结果 ROS结果显示，与Model组相比，LWDH组、Rap组、U0126等各组细胞的ROS水平皆降低（P＜0.05）。Western blot结果显示，与Model组相比，LWDH组、Rap组、LWDH+Rap组蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ增高（P＜0.05）;与Model组相比，LWDH组、Rap组与Rap+LWDH组的p-mTOR蛋白表达下调（P＜0.05）,LWDH组、U0126组的p-ERK1/2蛋白表达下调（P＜0.05）。结论 六味地黄丸治疗绝经后骨质疏松症的机制可能与抑制ERK/mTOR信号通路诱导氧化应激状态下成骨细胞自噬相关。
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