应用聚合酶链反应检测临床标本中的沙眼衣原体及与商品化试剂盒的比较

来源 :国际皮肤性病学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chencr33
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作者建立了检测沙眼衣原体隐蔽性质粒和主要外膜蛋白(MOMP)基因的聚合酶链反应(PCR),比较彼此的敏感性并与培养法、抗原ELISA(IDEIA)和Clearview进行比较。将沙眼衣原体L2标准株做100~1010倍稀释,每一稀释度各取200μl分别做培养、IDEIA、Clearview和PCR。IDEIA和Clearview根据说明书进行操作。用于PCR的标本经酚-氯仿抽提纯化,50μl PCR反应体积中含1μlDNA,2.5U Taq聚合酶,10mM dNTPs和50pmol引物。经94℃ 1分钟,45℃ 1分钟,72℃ 3分钟,共40个循环。

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