GFP-HPV18 E2删除突变体融合蛋白真核表达载体的构建与鉴定

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目的构建人乳头瘤病毒18型早期蛋白2(HPVl8E2)删除突变体N端(TAD)、C端(DBD)与增强型绿色荧光蛋白(GFP)融合蛋白的真核表达载体,为研究HPVl8E2基因与宫颈癌发生的关系提供实验基础。方法用PCR扩增HPVl8E2TAD、DBD基因序列,用EcoRI和BamHI双酶切pEGFP—C1载体与TAD、DBD基因PCR产物,纯化回收后,用连接酶连接并转化大肠杆菌JMl09,筛选阳性克隆,并对其进行双酶切和测序鉴定。结果阳性克隆质粒经双酶切后,琼脂糖凝胶电泳可见4.7kb、618bp和243b
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