中华绒螯蟹卵黄磷蛋白单克隆抗体制备及免疫组化应用

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本研究通过对中华绒螯蟹成熟卵巢中的卵黄磷蛋白进行分离,并使用全自动蛋白纯化仪和胶回收的方对其进行纯化,以此为抗原免疫小鼠,使之产生针对性抗体后进行融合筛选,获得稳定额单克隆细胞株,将细胞株培养后打入小鼠腹腔,制备腹水。随后从腹水中纯化收集抗体,并进行Elisa效价监测,结果表明,获得三株单克隆抗体2N17、3G2、2J11效价均高于64 K,抗体浓度为2N17:0.8 mg/ml,3G2:0.8 mg/ml,2J11:0.7 mg/ml。随后通过免疫组化技术对中华绒螯蟹卵黄磷蛋白在其胚胎和幼体中进行定位,
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