【摘 要】
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目的:建立一种定量检测糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D(GPI-PLD)基因表达水平的竞争性RT-PCR方法,以研究GPI-PLD与白血病等疾病的关系.方法:首先用PCR 定点诱变法构建GPI-PLD
【机 构】
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中南大学湘雅医学院生物化学教研室,湖南省交通医院
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目的:建立一种定量检测糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D(GPI-PLD)基因表达水平的竞争性RT-PCR方法,以研究GPI-PLD与白血病等疾病的关系.方法:首先用PCR 定点诱变法构建GPI-PLD的竞争性cDNA模板,该模板与靶cDNA具有相同的引物结合区,但在长度上要比靶cDNA少20个碱基.把该竞争性cDNA模板在体外转录出的竞争性RNA作为RT-PCR的内标准,与白血病细胞株K562细胞的总RNA在同一体系内进行逆转录和PCR扩增,二者的PCR产物因长度不同可经电泳区分开,然后对电泳图像进行光密度
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