【摘 要】
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目的:以THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞为研究对象,观察载脂蛋白A-Ⅰ对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇流出和三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)的影响,从而探讨载脂蛋白A-Ⅰ对动
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目的:以THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞为研究对象,观察载脂蛋白A-Ⅰ对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇流出和三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)的影响,从而探讨载脂蛋白A-Ⅰ对动脉粥样硬化(As)发生发展的影响.方法:用液体闪烁计数器检测细胞内胆固醇流出,高效液相色谱分析细胞内总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯含量,运用逆转录-多聚酶链反应和Western印迹分别检测ABCA1 mRNA与ABCA1蛋白的表达,用流式细胞术检测细胞平均ABCA1荧光强度.结果:载脂蛋白A-Ⅰ引起THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞总胆固醇、游离胆固醇与胆固醇酯呈时间依赖性减少,而ABCA1蛋白质水平、细胞平均ABCA1荧光强度以及细胞内胆固醇流出呈时间依赖性增加,但ABCA1 mRNA没有明显变化.巯基蛋白酶抑制剂(leupeptin和ALLN)增加ABCA1蛋白质水平,而其它蛋白酶抑制剂(pepstatin A、aprotinin及phosphoramiddon)不增加ABCA1蛋白质水平,蛋白体抑制剂(lactacytin)和溶酶体抑制剂(NH4Cl)也不影响ABCA1蛋白质水平.结论:巯基蛋白酶可降解THp-1巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1蛋白质,而载脂蛋白A-Ⅰ可阻碍巯基蛋白酶降解ABCA1蛋白质,从而提高THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1蛋白质水平,增加细胞内胆固醇流出,降低细胞内胆固醇聚积.
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