目的 鉴定引起2005年山东省兖州市一起无菌性脑膜炎暴发的病原体，并对分离的柯萨奇B5病毒（CVB5）进行基因特征分析。方法从充州市无菌性脑膜炎暴发期间部分住院患者中采集78份粪便标本和58份脑脊液标本进行病毒分离和血清型鉴定；同时对其阳性分离物采用反转录一聚合酶链反应进行分子定型，对其中的CVB5进行全长VP1区核苷酸序列测定和亲缘进化分析。结果78份粪便标本和58份脑脊液标本的病毒分离率分别为38．5％（30／78）和48．3％（28／58）。58株阳性分离物的血清型鉴定和分子定型结果显示，其中54株为CVB5，2株为ECH024，CVB3和CVA9各1株。病原学结果显示引起此次无菌性脑膜炎暴发的病原体主要为CVB5。同源性分析显示，CVB5分离株与2002年浙江分离株（Zhejiang／12／02株）在核苷酸水平上同源性最近，为97．5％，97．8％；与CVB5原型株（Faulkner株）相比核苷酸同源性为78．3％～78．6％。VP1区亲缘进化树显示CVB5可以分为A、B、C、D4个基因型，引起本次暴发的CVB5属于基因型D。结论CVB5是引起兖州市无菌性脑膜炎暴发的病原体。优势基因型的变迁可能是造成无菌性脑膜炎反复暴发的因素之一。