【摘 要】
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目的 制备抗乙型肝炎表面抗原(hepatitis B surface antigen,HBsAg)的单克隆抗体,检测单克隆抗体与15种变异HBsAg的反应模式.用筛选出的单抗建立快速检测变异HBsAg的ELISA实验方法,并做初步评价.方法 用中国乙型肝炎病毒感染者血清中分离的HBsAg免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤细胞融合技术制备抗-HBs单克隆抗体.检测不同单克隆抗体与野生及变异HBsAg的
【机 构】
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430030,武汉,华中科技大学同济医学院附属同济医院临床免疫研究室，430030,武汉,华中科技大学同济医学院附属同济医院实验医学研究中心,430030,武汉,华中科技大学同济医学院附属同济医院临床
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目的 制备抗乙型肝炎表面抗原(hepatitis B surface antigen,HBsAg)的单克隆抗体,检测单克隆抗体与15种变异HBsAg的反应模式.用筛选出的单抗建立快速检测变异HBsAg的ELISA实验方法,并做初步评价.方法 用中国乙型肝炎病毒感染者血清中分离的HBsAg免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤细胞融合技术制备抗-HBs单克隆抗体.检测不同单克隆抗体与野生及变异HBsAg的反应性.筛选出两种可以较好识别变异HBsAg的单克隆抗体McAb2和McAb3,建立两种抗体ELISA检测HBsAg的方法.结果 制备了14株抗-HBs单抗.经过初筛,有4种可以较好识别包括G145R在内的大多数变异HBsAg.优化了McAb2和McAb3检测HBsAg的条件,检测HBsAg的灵敏度较好,检测变异HBsAg的能力优于2种现行国产HBsAg检测试剂盒.结论 用本实验制备的单抗可以很好地识别包括G145R在内的大多数变异HBsAg。
其他文献
目的 制备高表达量、高活性的HV NP重组抗原,以此为基础建立一个可同时检测HFRS患者血清中IgM和IgG抗体的快速胶体金标记诊断试剂盒.方法 从TA-A537中扩增出截短的HV S基因片段p6-119,定向克隆至原核表达载体pET-30a中进行原核表达,采用亲和层析法纯化重组蛋白.以胶体金标记重组抗原,应用金标快速免疫层析法同时检测HFRS患者血清中IgM和IgG抗体.结果 金标快速免疫层析法
目的 探讨Toll样受体（TLR）信号途径负性调控因子在川崎病（KD）免疫发病机制中的作用。方法 急性期KD患儿48例，正常同年龄对照组16例，感染性疾病对照组（ID）16例。采用逆转录．聚合酶链反应（RT．PcR）及荧光定量PCR检测外周血单核，巨噬细胞（MC）TLR4信号途径传导分子、负性调节因子及前炎症细胞因子mRNA的表达。结果 （1）急性期KD患儿TLR4、MD-2、MyD88、IRAK
慢性乙型肝炎患者中往往存在针对HBV的免疫功能低下和免疫功能的紊乱.其体内的免疫功能低下和紊乱是否与乙型肝炎病毒HBV直接感染免疫细胞有关,目前尚无肯定的结论.为了阐明HBV感染免疫细胞对慢性乙型肝炎免疫功能的影响,本实验比较了外周血单个核细胞(PBMC)中HBV cccDNA阳性和阴性慢性乙肝患者PBMC的增殖能力和细胞因子IFN-γ、IL-10的产生能力。
细胞毒素相关基因A蛋白(cytotoxin-associated gene A,CagA)是幽门螺杆菌(Hp)最重要的毒力因子之一[1].流行病学研究认为,CagA阳性Hp感染与消化性溃疡和胃癌发生的关系比CagA阴性菌株更为密切,提示CagA可能是一种重要的疾病相关蛋白,在Hp致病过程中发挥作用[2].由于Hp菌株自身的变异,CagA阳性株与CagA阴性株间除cagA基因外存在许多差异之处,因此
最近研究发现,gyrB基因是16S rRNA基因以外适合细菌鉴别的又一理想靶基因.gyrB基因是编码DNA解旋酶B亚单位的基因,其显著优点是基因进化率较快,碱基替换频率较高,在相似细菌的检测和鉴别方面比16S rRNA基因更具优越性.本实验以10株沙门菌为受试对象,用PCR方法同时扩增其16S rRNA和gyrB基因,通过基因序列分析,比较两种基因对沙门菌的鉴别能力。
由中国微生物学会主办，湖北省微生物学会承办的“2006年中国微生物学会学术年会暨中国微生物学会第九次全国会员代表大会”，定于2006年10月27日-11月1日在湖北武汉中南花园酒店举行。现将有关会议报到通知如下。
目的 研究HLA新的等位基因HLA-A*3113的分子机制.方法 样本DNA抽提采用PEl-FREEZ抽提试剂盒,利用PCR方法扩增先证者HLA-A基因的第1～8外显子,PCR产物直接经TOPO TA克隆转染到质粒载体中获得等位基因的单链,对所得克隆进行第2、3、4外显子双向测序分析.应用序列特异性引物PCR方法证实测序所发现的突变.结果 先证者样本克隆测序得到两个等位基因,其中一个等位基因为A*
铜绿假单胞菌属于单端双鞭毛菌,而不是单端单鞭毛菌,这一发现是将菌种接种在哥伦比亚羊血琼脂平板上培养得出的[1].本文研究证实铜绿假单胞菌液体培养双鞭毛细胞数与单鞭毛细胞数的比值高于固体培养。
强直性脊柱炎(AS)患者131例,根据患者民族、籍贯挑选出北方汉族群体,临床均符合1984年AS纽约修订诊断标准.男女比例2.68:1,年龄5～69岁,平均25岁;采用微量淋巴细胞毒实验,筛选出118例HLA-B27阳性样本;正常对照组,从4202名中国北方汉族群体,主要包括北京、河北、河南、山东、辽宁、黑龙江、山西、陕西等近10个省市造血干细胞供者中,采用流式反向PCR-SSO(One Lamb