【摘 要】
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目的:验证微小RNA410 (miR-410)对白细胞介素-13(IL-13)mRNA的靶向调控作用.方法:采用生物信息学软件预测miR-410与IL-13 mRNA 3'端非翻译区存在结合位点,设计并合成包含miR-
【机 构】
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青岛大学附属医院,山东青岛266000
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目的:验证微小RNA410 (miR-410)对白细胞介素-13(IL-13)mRNA的靶向调控作用.方法:采用生物信息学软件预测miR-410与IL-13 mRNA 3'端非翻译区存在结合位点,设计并合成包含miR-410结合序列及突变序列的IL-13基因序列片段,分别构建野生型和突变型双荧光素酶基因载体,与miR-410和阴性对照序列共同转染293T细胞,检测转染后荧光素酶的活性,验证miR-410对IL-13 mRNA表达的影响.结果:生物信息学显示,IL-13 mRNA存在与miR4-10的结合位点.基因测序结果显示,野生型和突变型荧光素酶报告基因载体构建成功.通过双荧光素酶报告系统发现,miR-410能够结合野生型IL-13 mRNA荧光素酶基因序列从而抑制其表达,而对突变型IL-13 mRNA的荧光素酶表达无影响(P＜0.05).结论:miR-410可以靶向调控IL-13mRNA的表达.
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