NF-κB超抑制物IκBαM重组腺病毒的构建

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目的 在克隆IκBα基因并构建IκBαM的基础上,构建重组腺病毒AdIκBαM。方法 将IκBαM克隆至穿梭质粒,线性化后与骨架质粒共同转染BJ5183菌,构建重组腺病毒质粒。酶切及PCR法鉴定;将其线性化后转染293细胞,观察绿色荧光以确定转染结果,以Western blot法检测目的基因表达。结果 凝胶电泳及行酶切鉴定表明同源重组成功;一PCR产物测序证明确为lxBaM;以重组腺病毒质粒转染293细胞,见绿色荧光;感染293细胞得到大量病毒。结论 成功构建了IκBαM重组腺病毒,为进一步研究奠定了基础
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