【摘 要】
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目的:探讨LncRNA XIST对顺铂(CDDP)诱导的肝癌细胞活力和凋亡的影响及其可能的机制.方法:用miRanda预测XIST和miR-133a结合位点,用双荧光素酶报告实验分析二者之间的靶向关系.将肝癌HepG2细胞用10μmol/L的CDDP处理48 h后,分别转染siRNA-NC和XIST-siRNA,或miR-133a抑制剂和抑制剂NC,或pcD-NA-3.1(+)+mimic-NC、pcDNA-XIST+mimic-NC和pcDNA-XIST+miR-133a mimic,48 h后CCK-
【机 构】
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驻马店市中心医院肝胆胰脾外科 河南驻马店463000;河南省人民医院肝胆胰腺外科 郑州450003
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目的:探讨LncRNA XIST对顺铂(CDDP)诱导的肝癌细胞活力和凋亡的影响及其可能的机制.方法:用miRanda预测XIST和miR-133a结合位点,用双荧光素酶报告实验分析二者之间的靶向关系.将肝癌HepG2细胞用10μmol/L的CDDP处理48 h后,分别转染siRNA-NC和XIST-siRNA,或miR-133a抑制剂和抑制剂NC,或pcD-NA-3.1(+)+mimic-NC、pcDNA-XIST+mimic-NC和pcDNA-XIST+miR-133a mimic,48 h后CCK-8法检测细胞活力,Western blot法检测细胞中凋亡相关蛋白和Wnt/β-catenin通路蛋白的表达;实时荧光定量PCR法检测XIST和miR-133a表达水平.结果:miRanda预测XIST与miR-133a存在结合位点,双荧光素酶报告实验证实二者存在靶向关系.与siRNA-NC组比较,XIST-siRNA组细胞Bax、Caspase-3、Caspase-9、Wnt和β-catenin蛋白表达降低,Bcl-2表达升高,细胞活力升高(P<0.05).与抑制剂NC组比较,miR-133a抑制剂组Bax、Caspase-3、Caspase-9、Wnt和β-catenin蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达下降,细胞活力降低(P<0.05).与pcDNA-3.1(+)+mimic-NC组比较,pcDNA-XIST+mimic-NC组Bax、Caspase-3、Caspase-9、Wnt和β-catenin蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达降低,细胞活力升高(P0.05).结论:XIST可能通过调节miR-133a-Wnt/β-catenin轴促进CDDP诱导的HepG2细胞凋亡.
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