构建重组真核表达载体pLXSN-降钙素基因相关肽（CGRP），探讨CGRP对蛛网膜下腔出血（SAH）后脑血管痉挛（CVS）的治疗作用。
方法从SD大鼠中提取目的基因，构建重组质粒。将36只SD大鼠按照随机数字表法随机分成3组，均采用枕大池1次注血法制成SAH模型，于SAH后立体定向经侧脑室分别注入生理盐水、空载质粒p LXSN、重组质粒p LXSN-CGRP各20μl。分别检测SAH后24 h基底动脉形态学改变及血浆中CGRP的表达水平。
结果（1）重组质粒鉴定：双酶切后电泳可见2条特异条带，分别与pLXSN和rCGRPcDNA大小相吻合；测序结果经basic local alignment search tool分析，与rCGRP基因编码区全长序列基本完全一致；体外转染293-T细胞，Q-PCR及蛋白质印迹检测确认CGRP有表达。（2）基底动脉形态学检测：生理盐水组、空载质粒组、p LXSN-CGRP组血管管腔内周长（μm）分别为：460.1±52.5、446.2±55.3、609.7±47.9，生理盐水组与空载质粒组相比差异无统计学意义；生理盐水组、空载质粒组周长明显短于p LXSN-CGRP组（t=7.053、7.713，均P<0.01）。3组血管壁厚度（μm）分别为：23.91±1.96、24.55±2.11、14.35±1.87，生理盐水组与空载质粒组差异无统计学意义；与pLXSN-CGRP组相比，生理盐水组、空载质粒组血管壁厚度明显增加（t=11.812、12.602，均P<0.01）。pLXSN-CGRP组基底动脉痉挛程度较轻，表现为血管管腔内周长增加，血管壁厚度减小。（3）血浆中CGRP浓度（ng/L）检测：生理盐水组为102.7±5.7、空载质粒组为94.3±6.1、pLXSN-CGRP组为173.4±6.3，前两组相比差异无统计学意义；较pLXSN-CGRP组浓度明显降低（t=5.004、5.601，均P<0.01）。治疗组血浆中CGRP表达量增大。
结论成功构建重组质粒pLXSN-CGRP。枕大池1次注血法建立大鼠SAH后CVS模型，经侧脑室注入重组质粒导入CGRP基因，在SAH早期就可以缓解CVS，起到脑保护作用。