乌梢蛇Ⅱ型胶原蛋白的鉴定及其对胶原诱导性关节炎小鼠的干预研究

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目的:分析乌梢蛇Ⅱ型胶原蛋白(Zaocys typeⅡcollagen,ZCⅡ)与其他物种Ⅱ型胶原蛋白(CⅡcollagen)的同源性,探讨其对胶原诱导性关节炎(Collagen-induced arthritis,CIA)小鼠关节炎症的影响。方法:采用限制性胃蛋白酶消化法提取ZCⅡ;SDS-PAGE凝胶电泳及紫外分光光度计法对其鉴定,质谱分析其同源性。鸡CⅡ小鼠尾根部皮下注射诱导CIA模型;口服ZCⅡ高、中、低剂量干预,视觉评分法对关节炎评分,HE染色评价小鼠膝关节病理变化。结果:提取的ZCⅡ分子量约为110~140 kD,紫外吸收峰为230 nm左右;质谱分析所得肽质量指纹图谱与其他物种有4个以上肽段匹配,蛋白评分大于95%。在关节炎症方面,与正常对照组比较,CIA小鼠关节炎及组织病理学评分升高(P<0.05);与CIA模型组比较,不同剂量ZCⅡ干预组关节炎及组织病理学评分显著降低(P<0.05)。结论:质谱分析结果提示ZCⅡ与其他物种CⅡ具有较高同源性;ZCⅡ能显著抑制CIA小鼠的关节肿胀,改善关节组织病理变化。
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