CD8~+ T细胞PD-1基因CRISPR/Cas9编辑体系电穿孔条件的优化

来源 :郑州大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户：luminfeng

【摘要】

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目的:通过优化电穿孔递送条件,提高基于CRISPR/Cas9编辑体系对T细胞PD-1基因编辑效率。方法:在前期研究基础上,通过优化电转缓冲液和脉冲条件组合,对CD8^+T细胞的PD-1基因进

【作者】

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王淑敏张代群李峰张毅

【机构】

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郑州大学第一附属医院生物细胞治疗中心,郑州大学第一附属医院肿瘤中心,郑州大学生命科学学院,河南省肿瘤免疫与生物治疗重点实验室

【出处】

：

郑州大学学报(医学版)

【发表日期】

：

2019年3期

【关键词】

：

CRISPR/Cas9 基因编辑 T细胞免疫抑制受体 PD-1

【基金项目】

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国家自然科学基金资助项目(81502689);国家重点研发计划基金资助项目(2018YFC1313400)

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目的:通过优化电穿孔递送条件,提高基于CRISPR/Cas9编辑体系对T细胞PD-1基因编辑效率。方法:在前期研究基础上,通过优化电转缓冲液和脉冲条件组合,对CD8^+T细胞的PD-1基因进行敲除编辑,检测电穿孔后CD8^+T细胞凋亡、分化、增殖和PD-1表达情况。结果:与传统电穿孔方案(P3电转染缓冲液+EO115脉冲)相比,优化方案(P2电转染缓冲液+EH100脉冲)能显著提高PD-1敲除效率,但不影响T细胞存活、分化状态以及增殖。结论:P2电转染缓冲液+EH100脉冲的组合对T细胞PD-1基因的编辑

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