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采用RT-PCR方法克隆到绿色木霉(Trichoderma viride)AS3．3711的葡聚糖内切酶V(EGV)的cDNA基因。测序后构建到酿酒酵母诱导型表达载体pYES2上，转化酿酒酵母，同时研究了超声波处理对酵母完整细胞转化的影响。转化子用2％的β-D-半乳糖进行诱导，用Northem杂交和CMC糖化力法分别对目的基因的转录和表达产物的葡聚糖内切酶活性进行检测。结果表明，EGV的cDNA基因开放阅读框长度为741bp，编码247个氨基酸，推测的蛋白质分子量为24．99kDa。超声波处理60s的酿酒