【摘 要】
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【目的】苏云金芽胞杆菌（Bacillus thuringiensis,Bt） D18对鳞翅目、鞘翅目等农业害虫具有杀虫毒力，本研究拟通过复合诱变育种，筛选出杀虫毒力更高的突变菌。【方法】经四轮室温常压等离子体（ARTP）诱变和一轮ARTP-NTG复合诱变后，镜检形态观察与生物毒力测定筛选高毒力菌株，SDS-PAGE检测Cry蛋白，qRT-PCR定量cry基因的表达，揭示突变菌株毒力提高的原因。【结
【机 构】
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湖南师范大学生命科学学院省部共建淡水鱼类发育生物学国家重点实验室微生物分子生物学湖南省重点实验室
【基金项目】
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国家重点研发计划（2017YFD0201201）； 国家自然科学基金（31370116）～～；
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【目的】苏云金芽胞杆菌（Bacillus thuringiensis,Bt） D18对鳞翅目、鞘翅目等农业害虫具有杀虫毒力，本研究拟通过复合诱变育种，筛选出杀虫毒力更高的突变菌。【方法】经四轮室温常压等离子体（ARTP）诱变和一轮ARTP-NTG复合诱变后，镜检形态观察与生物毒力测定筛选高毒力菌株，SDS-PAGE检测Cry蛋白，qRT-PCR定量cry基因的表达，揭示突变菌株毒力提高的原因。【结果】复合诱变筛选到2株高毒力突变菌株An-L5-1和An-L5-7，与出发菌株BtD18相比，An-L5-1和An-L5-7的生长衰亡期略微提前；芽胞形成能力增强；Cry蛋白表达量分别提高了80.47%和88.31%；对小菜蛾和黏虫的杀虫毒力显著增强【。结论】突变菌株An-L5-1和An-L5-7杀虫活性提高主要是由于毒力基因cry1Aa、cry2Aa和调控基因sigK的表达显著上调。
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