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目的：建立一阶导数光谱法测定复方氯霉素滴眼液中氯霉素含量的方法。方法：一阶导数光谱法直接测定复方氯霉素滴眼液中氯霉素含量，于296．3nm波长处测定振幅D值。结果：氯霉素在5．15μg/ml-25．75μ/ml范围呈良好线性关系；其回归方程为D=11．204×10^-4C-0．5×10^-4（r=0．9998）；平均回收率100．02％、RSD=0．10％（n=5）。结论：本方法操作简单、准确，可用于测定复方氯霉素滴眼液中氯霉素的含量。