斑马鱼胸腺苷酸合成酶基因的克隆与表达

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用RT-PCR和RACE方法,从斑马鱼胚胎中克隆出胸腺苷酸合成酶(TS)的cDNA全长序列,分析表明,它的编码框序列含有954个核苷酸,编码一个分子量为36kD的318个氨基酸的蛋白序列。将斑马鱼TS的cDNA序列连接到pET-28表达载体上,构建了一个表达载体pET-28/Z-TS,并在大肠杆菌BL21(DE3)中进行了IPTG诱导表达,纯化的TS蛋白在28℃表现出比较高的生物活性,与人的TS蛋白的Km值比较接近。
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