猪流行性腹泻病毒CH-HuN1301株N基因重组表达载体的构建及稳定表达细胞系的建立

来源 :中国畜牧兽医 | 被引量 : 0次 | 上传用户：auiadufzxyw

【摘要】

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本研究旨在建立猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhea virus,PEDV）CH-HuN1301株N蛋白稳定表达细胞系。采用RT-PCR扩增PEDV新流行毒株CH-HuN1301株N基因,分别克隆至原核

【作者】

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唐青海杨海黎露陈果亮何丽芳刘最王芳宇

【机构】

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衡阳师范学院生命科学与环境学院,衡阳师范学院生物药物研究所,衡阳师范学院湖南益豚生态农业有限责任公司联合研究中心

【出处】

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中国畜牧兽医

【发表日期】

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2017年8期

【关键词】

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猪流行性腹泻病毒 CH-HuN1301毒株 N基因稳定细胞系 porcine epidemic diarrhea virus（PEDV） CH-HuN130

【基金项目】

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国家自然科学基金青年基金（31101837）, 衡阳师范学院引进人才专项项目（16D20）, 湖南省教育厅优秀青年项目（17B038）

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本研究旨在建立猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhea virus,PEDV）CH-HuN1301株N蛋白稳定表达细胞系。采用RT-PCR扩增PEDV新流行毒株CH-HuN1301株N基因,分别克隆至原核表达载体pET28a和真核表达载体pEGFP-C1构建重组表达载体,所测定的序列采用Mega 5.0软件进行进化分析。将原核表达的N蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,重组真核表达载体pEGFP-PEDV-N转染HEK293细胞,经用G418筛选获得稳定的表达细胞系。荧光倒置显微镜观察

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