【摘 要】
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目的在大肠杆菌中高效表达P30抗原.方法采用聚合酶链反应(PCR)从弓形虫昆山分离株cDNA文库中扩增得到编码P30抗原的基因,经DNA序列分析后导入表达载体pGEX-5x-3,然后在大肠杆
【机 构】
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苏州医学院寄生虫学教研室,复旦大学生命科学院生物化学系
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目的在大肠杆菌中高效表达P30抗原.方法采用聚合酶链反应(PCR)从弓形虫昆山分离株cDNA文库中扩增得到编码P30抗原的基因,经DNA序列分析后导入表达载体pGEX-5x-3,然后在大肠杆菌BL21中进行表达,用亲和层析柱纯化表达产物,并以SDS-PAGE和Western blotting进行鉴定.结果1、在我们比较的783个碱基中,弓形虫昆山分离株与RH株之间只有两个碱基不同;2、得到一分子量为54kDa的融合蛋白,占大肠杆菌总蛋白的38%.结论1、弓形虫昆山分离株与RH株的P30基因没有大的差异;2
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