水稻OsAAA1蛋白的原核表达载体构建及其可溶性表达研究

来源 :中南民族大学学报：自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：you19841231

【摘要】

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为使用外源表达载体表达并纯化有活性的水稻ATP酶蛋白Os AAA1,构建了p ET-32a-Os AAA1原核表达载体并进行体外IPTG诱导表达和Ni＋柱亲和层析纯化.利用SDS-PAGE和Western Blot检

【作者】

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刘新琼徐玮玉刘早利陈亚红程钢

【机构】

：

中南民族大学生命科学学院

【出处】

：

中南民族大学学报：自然科学版

【发表日期】

：

2015年2期

【关键词】

：

OS AAA1蛋白原核表达载体可溶性蛋白纯化 Os AAA1 prokaryotic expression vector soluble protein

【基金项目】

：

国家自然科学基金面上资助项目（31370306）, 湖北省自然科学基金重点资助项目（2013CFA098）

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为使用外源表达载体表达并纯化有活性的水稻ATP酶蛋白Os AAA1,构建了p ET-32a-Os AAA1原核表达载体并进行体外IPTG诱导表达和Ni＋柱亲和层析纯化.利用SDS-PAGE和Western Blot检测了目的蛋白.结果表明：将成功构建的p ET-32a-Os AAA1原核表达载体,转化到大肠杆菌Origami菌株后,在70~100 KD之间检测到可溶性目的蛋白带,并优化了诱导表达的较适温度、IPTG诱导浓度和诱导表达时间.故成功构建了p ET-32a-Os AAA1原核表达载体并获得了可溶

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