【摘 要】
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目的：克隆花生主要过敏原Arah6基因，诱导表达并纯化该蛋白，检测其免疫活性。方法：提取花生总RNA，设计特异性引物，RT—PCR克隆花生Arah6的基因，将测序正确的片段连入原核表达栽体pET-
【机 构】
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深圳大学医学院过敏反应与免疫学研究所,中南大学湘雅二医院
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目的：克隆花生主要过敏原Arah6基因，诱导表达并纯化该蛋白，检测其免疫活性。方法：提取花生总RNA，设计特异性引物，RT—PCR克隆花生Arah6的基因，将测序正确的片段连入原核表达栽体pET-28a上，并转入BL21（DE3）宿主表达菌中，IPTG诱导表达，通过NP亲和层析柱纯化目的蛋白，Western—blotting检测该重组蛋白的免疫原性。结果：测序结果表明花生Arah6目的片段全长为438bp，编码145个氨基酸，与GenBank中蛋白序列100％相同。该基因诱导表达的产物纯化后经SDS—PA
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