【摘 要】
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单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNP)是一种重要的DNA分子标记,在中药真伪鉴定中有广泛应用。为寻找一种简单快速、稳定性好的SNP分型方法,本研究将限制性
【机 构】
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北京师范大学资源学院,资源生态与中药资源研究所,道地药材国家重点实验室,中国中医科学院中药资源中心,
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单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNP)是一种重要的DNA分子标记,在中药真伪鉴定中有广泛应用。为寻找一种简单快速、稳定性好的SNP分型方法,本研究将限制性内切酶引入熔解曲线分析中,建立了一种新的SNP分型方法,并分别以金银花/山银花、白术/苍术叶绿体序列SNP位点为例,检测了位于或不位于内切酶识别序列区的SNP位点分型能力,结果表明在引物5’端加上长链GC夹子(cggcgggagggcgg)进行扩增,然后选择合适的限制性内切酶酶切,金银花或白术正品酶切产物熔解曲线均为双峰,而混淆品山银花或苍术均为单峰,可实现准确分型,且该方法简单快速、稳定性好,被命名为酶切-熔解曲线分析法(restriction endonuclease digest-melting curve analysis)。
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