【摘 要】
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目的:研究人心包外脂肪干细胞生物学性状,并探讨向心肌细胞诱导时期的情况.为脂肪干细胞移植治疗心肌梗死提供优良的种子细胞.方法:通过胶原酶消化法,由人心包外脂肪组织获得
【机 构】
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山西医科大学第一医院心外科 太原,030001
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目的:研究人心包外脂肪干细胞生物学性状,并探讨向心肌细胞诱导时期的情况.为脂肪干细胞移植治疗心肌梗死提供优良的种子细胞.方法:通过胶原酶消化法,由人心包外脂肪组织获得脂肪干细胞,通过细胞免疫学方法检测人心包外脂肪干细胞细胞表面抗原的表达,并定量分析;利用RT-PCR、real-time PCR法定量检测人心包外脂肪干细胞细胞多能性基因(Pluripotent mRNA)的表达;采用血细胞计数板计数并比较诱导获得的心肌细胞数量;免疫组织化学法检测诱导获得的心肌细胞表达心肌特异性抗α-actin、cTnT,进行表型鉴定.结果:人心包外脂肪干细胞体外培养过程中贴壁生长,通过形态学特征以及脂肪干细胞特异性相关抗原检测证实,得到高纯度人心包外脂肪干细胞.其表面标记物CD44、CD90表达阳性,并在3、4代传代细胞中荧光强度达峰值.多能性基因(Oct-4、Rex1、Nanog)的表达随细胞传代而下降.经心肌诱导培养基体外诱导培养后,分化的细胞大多呈肌细胞样,且在3、4代细胞数量达峰值.细胞免疫化学检测证实心肌特异性抗α-actin、cTnT表达阳性.结论:细胞表面荧光强度及多能性基因(Pluripotent mRNA)表达量的变化可影响脂肪干细胞向心肌细胞的诱导,脂肪干细胞处于传代早期时向心肌诱导的可能性大,因此可选择早期向心肌细胞的诱导,这可能为脂肪干细胞移植治疗心肌梗死奠定基础.
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