背景：目前获取原代皮质神经元和星形胶质细胞的方法很多，传统方法通常是分别获取这两种细胞，但实验方法过于繁琐且浪费实验材料。找到一种简单、经济、可行并同时提取这两种细胞的培养方法尤为重要。目的：观察同时提取培养SD乳鼠大脑皮质神经元及星形胶质细胞的效果及注意事项。方法：选用出生24 h内的SD乳鼠，用体积分数为75%乙醇浸泡消毒，待乳鼠昏迷后断脊处死，沿乳鼠颈部用剪刀离断头颅并放入装有高糖DMEM的小烧杯中，沿矢状缝打开头颅并取出大脑放入盛有高糖DMEM的培养皿中。在冰上剥出脑膜及血管，夹取皮质表面2.0-3.0mm的脑组织，通过木瓜酶和DNA酶进行消化20 min，用含有体积分数为10%胎牛血清的DMEM/F12终止消化。以细胞浓度为1.0×10~9L-1种植于含有爬片（用多聚赖氨酸处理）的6孔板中，分别于1,3,5,7 d通过倒置荧光显微镜下观察神经元的形态变化，使用Calcien-AM进行活细胞染色观察细胞活性，β-Tubulin、MAP2免疫荧光染色对神经元进行鉴定。将剩余大脑皮质进行星形胶质细胞的提取，经过胰酶消化、过滤、吹打，以适宜的浓度接种于培养瓶中，待细胞融合度达到90%时，进行恒温水平摇床振荡24 h以纯化星形胶质细胞。当细胞传代纯化后以1.0×10~9 L-1接种于6孔板中培养，GFAP免疫荧光染色对星形胶质细胞进行鉴定。结果与结论：（1）培养1 d后可见神经元贴壁生长，胞体增大，部分聚集生长，细胞间有少量的突触连接；培养3,5 d后胞体进一步增大，突触增粗伸长相互连接；培养7 d后神经元明显聚集，突触增长增粗，相互连接形成致密的细胞网。Calcien-AM活细胞染色可见神经元活性较好，经β-Tubulin、MAP2免疫荧光鉴定细胞纯度大于90%。（2）培养3 d后星形胶质细胞胞体增大，呈现梭状、不规则状，细胞间出现少量相互连接，细胞间存在较多小胶质细胞；培养5 d后胞体、突起进一步增大；培养7 d发现细胞间的小胶质细胞及其他杂质明显减少，背景较为干净。经GFAP免疫荧光鉴定细胞纯度大于95%。（3）此方法获得的皮质神经元和星形胶质细胞形态好、杂质少、纯度高，可满足神经科学研究对高纯度的皮质神经元及星形胶质细胞的需求。