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摘要 [目的]测定我国西沙诺尼果汁总皂苷的含量。[方法]采用香草醛-高氯酸比色法测定了我国西沙诺尼果汁总皂苷的含量，并与大溪地诺尼果汁进行了比较。[结果]试验表明，西沙诺尼果汁总皂苷含量范围为387.6～476.4 mg/L，平均值为（419.4±34.5） mg/L，大溪地诺尼果汁总皂苷含量范围为395.5～614.5 mg/L。西沙诺尼果汁总皂苷含量与大溪地诺尼果汁无明显差异。[结论]该试验可为我国西沙诺尼果汁的保健功效研究、资源利用和产品开发提供依据。
关键词 西沙诺尼； 诺尼果汁； 总皂苷； 大溪地
中图分类号 S609.9 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2014）27-09525-02
Determination of Total Saponin in Xisha Noni Juice
CHEN Jianguo1， LI Xue1， LI Jinxia1， CHENG Chi1*
（China National Research Institute of Food and Fermentation Industries， China Center of Industrial Culture Collection， Beijing 100015）
Abstract [Objective] To determine the content of total saponin in Xisha noni juice in China.
[Method] The total saponin content in Xisha noni juice was analyzed by VanillinHClO4 colorimetry and compared with Tahiti noni juice.[Result] The results showed that total saponin content in Xisha noni juice was 387.6-476.4 mg/L with a mean of （419.4±34.5） mg/L and that in Tahiti noni juice was 395.5-614.5 mg/L. There was no significant differences in total saponin content of Xisha and Tahiti noni juice. [Conclusion] The study cam provide reference for healthy function research， resource utilization and products development of Xisha noni juice in China.
Key words Xisha noni； Noni juice； Total saponin； Tahiti
诺尼（Noni），学名海巴戟天（Morinda citrifolia Linn.），属茜草科（Rubiaceae）植物，是一种常绿小乔木，原产于一些太平洋岛屿，在世界其他热带地区也有变种分布，果实由黄色转变为白色即可采摘。诺尼果汁有较高的营养和药用价值，具有抗肿瘤、抗氧化、增强免疫力、降血脂和保护心血管等功能，对多种疾病有预防和治疗作用[1-4]。
皂苷（Saponin）是苷元为三萜或螺旋甾烷类化合物的一类糖苷，主要分布于陆地高等植物中，其中包括如人参皂苷、西洋参皂苷、三七皂苷、红景天苷等，具有良好的缓解体力疲劳、增强免疫力、抗氧化、保护心血管系统等活性[5-8]，皂苷的保健功能在我国已受到重视，并开发成保健食品。诺尼果汁是一种新型的保健食材，具有抗疲劳和增强免疫力等作用[2，9-10]，但对诺尼果汁皂苷的研究未见报道。为此，参考《保健食品功效成分检测方法》[11]，笔者采用香草醛-高氯酸比色法首次检测了我国西沙诺尼果汁总皂苷的含量，并与大溪地诺尼果汁进行了比较，为我国西沙诺尼果汁的保健功效研究、资源利用和产品开发提供依据。
1 材料与方法
1.1 材料
人参皂苷Re标准品，中国药品生物制品检定所；香草醛、乙醇、高氯酸、冰乙酸，均为分析纯；PT大孔吸附树脂柱，河北省津杨滤材厂。
西沙诺尼果汁由海南诺尼生物工程开发有限公司生产，产品批次为20120112、20120625、20120911、20130326和20130603；大溪地诺尼果汁Tht1、Tht2、Tht3、Tht4和Tht5为市售产品，采集于法属玻利尼西亚大溪地岛；上述样品均为100%纯诺尼果汁。
主要仪器：分光光度计，UNICO WFJ2000；电子天平，METTLERTOLEDO公司；恒温水浴锅，天津市泰斯特仪器有限公司。
1.2 方法
1.2.1 标准曲线测定[11]。
标准品溶液配制：精密称取人参皂苷Re 20 mg，置于10 ml容量瓶，用甲醇溶解并定容至刻度，摇匀（浓度为2 mg/ml），备用（低温保存）。
5%香草醛溶液配制：称取5 g香草醛，加冰乙酸溶解并定容至100 ml。
标准曲线绘制：精密吸取标准品溶液0、0.02、0.04、006、0.08和0.10 ml，分别置于10 ml比色管中，用氮气吹干，向其中加入0.2 ml的5 %香草醛溶液，转动比色管，使残渣溶液，再加入0.8 ml高氯酸，混匀后塞紧盖子，于60 ℃以下水浴上加温15 min取出，冷却后准确加入冰乙酸5.0 ml，摇匀后于波长560 nm处以试剂空白作为参照测定吸光值。以人参总皂苷Re的含量为横坐标x（μg/ml），以吸光值为纵坐标y绘制标准曲线。 1.2.2 样品总皂苷含量的测定。
准确吸取1.0 ml诺尼果汁，稀释10倍后，准确吸取1.0 ml加入PT大孔吸附树脂柱中，然后用15 ml去离子水洗柱，以洗去糖分等水溶性杂质，弃去洗脱液，再用20 ml 85%乙醇洗脱总皂苷，收集洗脱液于蒸发皿中，于60 ℃以下水浴上蒸干。
在上述已挥干的蒸发皿中，准确加入0.2 ml的5%香草醛冰乙酸溶解，转动蒸发皿，使残渣溶解，再加入0.8 ml高氯酸，转移至10 ml比色管中，混匀后塞紧盖子，于60 ℃以下水浴上加温15 min取出，冷却后准确加入冰乙酸5.0 ml，摇匀后，于波长560 nm处测定吸光度，以未加显色剂的样品作为空白，计算诺尼果汁总皂苷的含量。
1.2.3 结果计算。
根据标准曲线，计算样品中总皂苷的含量：
3 讨论
诺尼作为药用植物已有近千年的使用历史，其果浆也已于2010年5月被我国卫生部正式批准列入新资源食品名单，自此我国的诺尼健康产业也正在以前所未有的速度发展，因此对于其功效成分的研究也亟待加速。
早先的研究已表明，西沙诺尼果汁是一种具有丰富营养成分且天然健康的功能饮品，其营养成分组成与库克、大溪地诺尼果汁类似，其中粗多糖、钾、铁等含量更优于进口产品[12]，而且具有辅助改善癌症患者化疗副作用的效果[13]。在此基础上，笔者首次对我国西沙诺尼果汁总皂苷类物质的含量进行了测定，得出含量范围为387.6～476.4 mg/L，平均值为（419.4±34.5）mg/L。5种大溪地诺尼果汁总皂苷含量范围为395.5～614.5 mg/L，与西沙诺尼果汁产品进行对比，发现总皂苷含量无明显差异。
对近8年国家食品药品监督管理总局批准的皂苷类保健食品进行统计，日推荐用量为4.05～104.0 mg/d（以功效成分计），而西沙诺尼果汁推荐饮用量为100 ml/d，含皂苷类物质41.94 mg，在保健食品的日推荐饮用量范围内。该研究为西沙诺尼果汁保健功能的开发应用提供了参考依据。
参考文献
[1] WANG M Y，NOWICKI D，ANDERSON G，et al.Liver protective effects of Morinda citrifolia（Noni）[J].Plant Foods Hum Nutr，2008，63（2）：59-63.
[2] PALU A K，KIM A H，WEST B J，et al.The effects of Morinda citrifolia L.（noni）on the immune system：its molecular mechanism of action [J].J Ethnopharmacol，2008，115（3）：502-506.
[3] BROWN A C.Anticancer activity of Morinda citrifolia（Noni）fruit：a review[J].Phytother Res，2012，26（10）：1427-1440.
[4] LI J，STICKEL S L，BOUTONVERVILLE H，et al.Fermented Noni exudate（fNE）：a mediator between immune system and antitumor activity [J].Oncol Rep，2008，20（6）：1505-1509.
[5] 张善玉，朴惠顺，申英爱.黄芪多糖与人参总皂苷联用的免疫调节作用初步研究[J].中国药房，2005，16（21）：1620-1622.
[6] SONG X，CHEN J，SAKWIWATKUL K，et al.Enhancement of immune responses to influenza vaccine（H3N2）by ginsenoside Re[J].Int Immunopharmacol，2010，10（3）：351-356.
[7] 曲婷婷，金岩，柳越冬，等.人参总皂苷Rb1、Rg1与5氟脲嘧啶对荷瘤小鼠免疫功能的影响[J].中医研究，2006，19（5）：16-18.
[8] JIAN J，HU Z F，HUANG Y.Effect of ginsenoside Rg3 on Pim3 and Bad proteins in human pancreatic cancer cell line PANC1[J].Chin J Cancer，2009，28（5）：461-465.
[9] MA D，WEST B J，SU C X，et al.Evaluation of the ergogenic potential of noni juice[J].Phytother Res，2007，21：1100-1101.
[10] AFA K P，SEIFULLA R D，BRETT J，et al.Morinda citrifolia L.（noni）improves athlete endurance：Its mechanisms of action[J].Journal of Medicinal Plants Research，2008，2（7）：154-158.
[11] 白鸿.保健食品功效成分检测方法[M].北京：中国中医药出版社，2011：113-115.
[12] 李金霞，刘文慧，程池，等.西沙诺尼果汁的营养成分分析[J].食品科技，2014，39（5）：56-59.
[13] 程池，陈建国，刘洋，等.西沙诺尼果汁辅助改善鼻咽癌患者化疗副作用1例报告[J].食品与发酵工业，2014，40（4）：56-58.
关键词 西沙诺尼； 诺尼果汁； 总皂苷； 大溪地
中图分类号 S609.9 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2014）27-09525-02
Determination of Total Saponin in Xisha Noni Juice
CHEN Jianguo1， LI Xue1， LI Jinxia1， CHENG Chi1*
（China National Research Institute of Food and Fermentation Industries， China Center of Industrial Culture Collection， Beijing 100015）
Abstract [Objective] To determine the content of total saponin in Xisha noni juice in China.
[Method] The total saponin content in Xisha noni juice was analyzed by VanillinHClO4 colorimetry and compared with Tahiti noni juice.[Result] The results showed that total saponin content in Xisha noni juice was 387.6-476.4 mg/L with a mean of （419.4±34.5） mg/L and that in Tahiti noni juice was 395.5-614.5 mg/L. There was no significant differences in total saponin content of Xisha and Tahiti noni juice. [Conclusion] The study cam provide reference for healthy function research， resource utilization and products development of Xisha noni juice in China.
Key words Xisha noni； Noni juice； Total saponin； Tahiti
诺尼（Noni），学名海巴戟天（Morinda citrifolia Linn.），属茜草科（Rubiaceae）植物，是一种常绿小乔木，原产于一些太平洋岛屿，在世界其他热带地区也有变种分布，果实由黄色转变为白色即可采摘。诺尼果汁有较高的营养和药用价值，具有抗肿瘤、抗氧化、增强免疫力、降血脂和保护心血管等功能，对多种疾病有预防和治疗作用[1-4]。
皂苷（Saponin）是苷元为三萜或螺旋甾烷类化合物的一类糖苷，主要分布于陆地高等植物中，其中包括如人参皂苷、西洋参皂苷、三七皂苷、红景天苷等，具有良好的缓解体力疲劳、增强免疫力、抗氧化、保护心血管系统等活性[5-8]，皂苷的保健功能在我国已受到重视，并开发成保健食品。诺尼果汁是一种新型的保健食材，具有抗疲劳和增强免疫力等作用[2，9-10]，但对诺尼果汁皂苷的研究未见报道。为此，参考《保健食品功效成分检测方法》[11]，笔者采用香草醛-高氯酸比色法首次检测了我国西沙诺尼果汁总皂苷的含量，并与大溪地诺尼果汁进行了比较，为我国西沙诺尼果汁的保健功效研究、资源利用和产品开发提供依据。
1 材料与方法
1.1 材料
人参皂苷Re标准品，中国药品生物制品检定所；香草醛、乙醇、高氯酸、冰乙酸，均为分析纯；PT大孔吸附树脂柱，河北省津杨滤材厂。
西沙诺尼果汁由海南诺尼生物工程开发有限公司生产，产品批次为20120112、20120625、20120911、20130326和20130603；大溪地诺尼果汁Tht1、Tht2、Tht3、Tht4和Tht5为市售产品，采集于法属玻利尼西亚大溪地岛；上述样品均为100%纯诺尼果汁。
主要仪器：分光光度计，UNICO WFJ2000；电子天平，METTLERTOLEDO公司；恒温水浴锅，天津市泰斯特仪器有限公司。
1.2 方法
1.2.1 标准曲线测定[11]。
标准品溶液配制：精密称取人参皂苷Re 20 mg，置于10 ml容量瓶，用甲醇溶解并定容至刻度，摇匀（浓度为2 mg/ml），备用（低温保存）。
5%香草醛溶液配制：称取5 g香草醛，加冰乙酸溶解并定容至100 ml。
标准曲线绘制：精密吸取标准品溶液0、0.02、0.04、006、0.08和0.10 ml，分别置于10 ml比色管中，用氮气吹干，向其中加入0.2 ml的5 %香草醛溶液，转动比色管，使残渣溶液，再加入0.8 ml高氯酸，混匀后塞紧盖子，于60 ℃以下水浴上加温15 min取出，冷却后准确加入冰乙酸5.0 ml，摇匀后于波长560 nm处以试剂空白作为参照测定吸光值。以人参总皂苷Re的含量为横坐标x（μg/ml），以吸光值为纵坐标y绘制标准曲线。 1.2.2 样品总皂苷含量的测定。
准确吸取1.0 ml诺尼果汁，稀释10倍后，准确吸取1.0 ml加入PT大孔吸附树脂柱中，然后用15 ml去离子水洗柱，以洗去糖分等水溶性杂质，弃去洗脱液，再用20 ml 85%乙醇洗脱总皂苷，收集洗脱液于蒸发皿中，于60 ℃以下水浴上蒸干。
在上述已挥干的蒸发皿中，准确加入0.2 ml的5%香草醛冰乙酸溶解，转动蒸发皿，使残渣溶解，再加入0.8 ml高氯酸，转移至10 ml比色管中，混匀后塞紧盖子，于60 ℃以下水浴上加温15 min取出，冷却后准确加入冰乙酸5.0 ml，摇匀后，于波长560 nm处测定吸光度，以未加显色剂的样品作为空白，计算诺尼果汁总皂苷的含量。
1.2.3 结果计算。
根据标准曲线，计算样品中总皂苷的含量：
3 讨论
诺尼作为药用植物已有近千年的使用历史，其果浆也已于2010年5月被我国卫生部正式批准列入新资源食品名单，自此我国的诺尼健康产业也正在以前所未有的速度发展，因此对于其功效成分的研究也亟待加速。
早先的研究已表明，西沙诺尼果汁是一种具有丰富营养成分且天然健康的功能饮品，其营养成分组成与库克、大溪地诺尼果汁类似，其中粗多糖、钾、铁等含量更优于进口产品[12]，而且具有辅助改善癌症患者化疗副作用的效果[13]。在此基础上，笔者首次对我国西沙诺尼果汁总皂苷类物质的含量进行了测定，得出含量范围为387.6～476.4 mg/L，平均值为（419.4±34.5）mg/L。5种大溪地诺尼果汁总皂苷含量范围为395.5～614.5 mg/L，与西沙诺尼果汁产品进行对比，发现总皂苷含量无明显差异。
对近8年国家食品药品监督管理总局批准的皂苷类保健食品进行统计，日推荐用量为4.05～104.0 mg/d（以功效成分计），而西沙诺尼果汁推荐饮用量为100 ml/d，含皂苷类物质41.94 mg，在保健食品的日推荐饮用量范围内。该研究为西沙诺尼果汁保健功能的开发应用提供了参考依据。
参考文献
[1] WANG M Y，NOWICKI D，ANDERSON G，et al.Liver protective effects of Morinda citrifolia（Noni）[J].Plant Foods Hum Nutr，2008，63（2）：59-63.
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[4] LI J，STICKEL S L，BOUTONVERVILLE H，et al.Fermented Noni exudate（fNE）：a mediator between immune system and antitumor activity [J].Oncol Rep，2008，20（6）：1505-1509.
[5] 张善玉，朴惠顺，申英爱.黄芪多糖与人参总皂苷联用的免疫调节作用初步研究[J].中国药房，2005，16（21）：1620-1622.
[6] SONG X，CHEN J，SAKWIWATKUL K，et al.Enhancement of immune responses to influenza vaccine（H3N2）by ginsenoside Re[J].Int Immunopharmacol，2010，10（3）：351-356.
[7] 曲婷婷，金岩，柳越冬，等.人参总皂苷Rb1、Rg1与5氟脲嘧啶对荷瘤小鼠免疫功能的影响[J].中医研究，2006，19（5）：16-18.
[8] JIAN J，HU Z F，HUANG Y.Effect of ginsenoside Rg3 on Pim3 and Bad proteins in human pancreatic cancer cell line PANC1[J].Chin J Cancer，2009，28（5）：461-465.
[9] MA D，WEST B J，SU C X，et al.Evaluation of the ergogenic potential of noni juice[J].Phytother Res，2007，21：1100-1101.
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[11] 白鸿.保健食品功效成分检测方法[M].北京：中国中医药出版社，2011：113-115.
[12] 李金霞，刘文慧，程池，等.西沙诺尼果汁的营养成分分析[J].食品科技，2014，39（5）：56-59.
[13] 程池，陈建国，刘洋，等.西沙诺尼果汁辅助改善鼻咽癌患者化疗副作用1例报告[J].食品与发酵工业，2014，40（4）：56-58.