【摘 要】
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目的探讨人脐带间充质干细胞(HUC-MSCs)对高糖状态下Toll样受体(TLR)介导的足细胞固有免疫反应的影响。方法将小鼠足细胞分为4组:正常糖浓度组(NG)、甘露醇组(NG+MA)、高糖浓度组(HG)、高糖浓度下足细胞与HUC-MSCs共培养组(HG+MSC)。刺激72 h后,ELISA方法检测各组培养基上清中炎性因子白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、TLR配体热休克蛋白
【机 构】
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目的探讨人脐带间充质干细胞(HUC-MSCs)对高糖状态下Toll样受体(TLR)介导的足细胞固有免疫反应的影响。
方法将小鼠足细胞分为4组:正常糖浓度组(NG)、甘露醇组(NG+MA)、高糖浓度组(HG)、高糖浓度下足细胞与HUC-MSCs共培养组(HG+MSC)。刺激72 h后,ELISA方法检测各组培养基上清中炎性因子白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、TLR配体热休克蛋白70(HSP70)、高迁移率族蛋白1(HMGB1)的表达,实时定量PCR法检测各组细胞表面及细胞提取物中TLR2、TLR4的mRNA表达,Western印迹检测TLR2、TLR4、髓样分化因子88(MyD-88)、磷酸化P65(p-P65)的蛋白表达,免疫荧光染色观察p-P65在足细胞内的定位。
结果与NG组比较,HG组炎性因子IL-6、TNF-α、TLR配体HSP70、HMGB1的蛋白表达增多(均P<0.05),TLR2、TLR4的mRNA和蛋白水平增加(均P<0.05),MyD-88及p-P65蛋白表达增多(均P<0.05),免疫荧光染色可见p-P65核内转移。与HG组比较,HG+MSC组炎性因子IL-6、TNF-α,TLR配体HSP70、HMGB1蛋白表达减少(均P<0.05),TLR2、TLR4 mRNA和蛋白水平减少(均P<0.05),MyD-88、p-P65的蛋白表达减少(均P<0.05),免疫荧光染色示p-P65核内转移不明显。
结论高糖刺激可使TLR介导的足细胞固有免疫反应增强,HUC-MSCs共培养可通过抑制TLR通路减轻免疫反应。
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