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目的
采用改良灌注法制备大鼠全胰腺脱细胞基质生物支架(acellular pancreatic bioscaffold,APB),并对其生物化学特征进行评价。
方法选取10只新鲜大鼠胰腺组织,通过门静脉灌注制备大鼠APB,观察APB的形态学结构,检测其细胞外基质(extracellular matrix,ECM)成分及含量、DNA含量,随后将APB种植于小鼠皮下,评估其生物相容性,最后将AR42J细胞株种植于APB上观察其增殖分化状况。
结果脱细胞过程结束后APB颜色透明,原有组织轮廓保留完整。免疫荧光染色结果显示APB中可见Ⅰ型胶原、Ⅳ型胶原、纤维黏连蛋白和层黏连蛋白的保存。APB的DNA含量与正常大鼠胰腺组织相比明显降低(P<0.05)。第14天移植物重塑评分为10.4±1.8,28 d后为13.8±1.3。再细胞化的APB可促进种植细胞增殖,α-淀粉酶表达阳性。
结论制备的APB符合脱细胞标准,维持原有的3D结构,具有良好的免疫原性,有利于种植细胞的增殖分化。