大黄鱼β-actin抗体的制备与组织表达谱分析

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为探讨大黄鱼(Larimichthyscrocea)β-actin基因化cActb)作为内参基因进行相关研究的可行性,从转录和翻译水平研究其组织表达谱,作者以大黄鱼肝脏为材料,扩增LcActb的开放阅读框序列,并将其亚克隆至原核表达载体pET32a(+)。酶切、测序结果表明,pET32a-LcActb构建成功。将pET32a.LcActb转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行优化表达,表达蛋白经纯化后进行Westernblotting验证;原核表达结果表明,IPTG可诱导一个分子量约45ku的特异蛋白,且
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