【摘 要】
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目的 基于TrkB-CREB探讨白术(AM)对神经退行性疾病的神经保护作用.方法 首将温度诱导表达Aβ的AD模式秀丽隐杆线虫CL4176分为空白对照组,阳性对照组(50 μmol/L咯利普兰),AM低、中、高剂量组(100,200,300 μg/mL),检测其对Aβ诱导损伤的缓解作用;Aβ1-42体外诱导N2a建立AD损伤细胞模型,评估AM的神经保护作用.采用Mpp+或鱼藤酮体外诱导N2a细胞和N2线虫建立PD损伤模型,检测细胞活力和N2线虫寿命;荧光显微镜下检测PD转基因线虫NL5901头部α-synu
【机 构】
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河南中医药大学中医药科学院,河南郑州450046;河南中医药大学药学院,河南郑州450046;河南中医药大学中医药科学院,河南郑州450046
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目的 基于TrkB-CREB探讨白术(AM)对神经退行性疾病的神经保护作用.方法 首将温度诱导表达Aβ的AD模式秀丽隐杆线虫CL4176分为空白对照组,阳性对照组(50 μmol/L咯利普兰),AM低、中、高剂量组(100,200,300 μg/mL),检测其对Aβ诱导损伤的缓解作用;Aβ1-42体外诱导N2a建立AD损伤细胞模型,评估AM的神经保护作用.采用Mpp+或鱼藤酮体外诱导N2a细胞和N2线虫建立PD损伤模型,检测细胞活力和N2线虫寿命;荧光显微镜下检测PD转基因线虫NL5901头部α-synuclein的荧光强度.在分子水平上采用荧光素酶报告基因法检测CREB的转录活性;RT-PCR法检测Creb下游靶基因的表达;Western-Blot法检测CREB及p-CREB蛋白表达水平;Autodock Vina软件进行白术活性成分与靶点蛋白的分子对接.结果 不同浓度的AM可提高MPP+或Aβ1-42损伤下N2a的细胞活力(P＜0.05),延缓CL4176的瘫痪时间(P＜0.05)、显著延长N2的寿命(P＜0.01)且降低NL5901线虫头部α-syn的荧光强度(P＜0.01);增强CREB转录活性(P＜0.01),并提高Creb下游基因Bdnf Psd-95和Bcl-2的mRNA表达水平(P＜0.05);剂量依赖性促进p-CREB的表达(P＜0.05).Docking结果显示白术中多个活性成分可与TrkB蛋白形成氢键稳定结合.结论 白术具有神经保护的作用,其机制可能与激活TrkB-CREB通路有关.
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