【摘 要】
：
为探究转移相关肺腺癌转录本 1(metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript 1,MALAT1)对 miR-146a 的调控作用及其对关节软骨细胞凋亡和基质降解的影响,采用RT-P
【机 构】
：
川北医学院附属医院 骨科,南充 637000
论文部分内容阅读
为探究转移相关肺腺癌转录本 1(metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript 1,MALAT1)对 miR-146a 的调控作用及其对关节软骨细胞凋亡和基质降解的影响,采用RT-PCR检测临床软骨组织中miR-146a和MALAT1的表达,分析其变化的相关性;双荧光素酶报告基因试验检测miR-146a和MALAT1的靶向作用关系;之后分组并转染miR-146a mimics或MALAT1重组过表达载体,经过IL-1β处理,采用RT-PCR检测miR-146a表达,CCK-8检测细胞增殖水平,Hoechst检测细胞凋亡水平,Western blotting检测活化型半胱天冬酶3(cleaved caspase 3,cl-CASP3)、B细胞淋巴瘤因子2(B-cell lymphoma 2,Bcl-2)、Bcl-2相关 X 蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax)、基质金属蛋白酶 13(matrix metalloproteinase 13,MMP-13)、带有血小板凝血酶敏感蛋白结构域的解聚素金属蛋白酶5(A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 5,ADAMTS-5)、Ⅱ型胶原蛋白(collagen Ⅱ,COL2)、聚蛋白聚糖蛋白水平.结果显示,相比于普通关节软骨组织,骨关节炎(osteoarthritis,OA)关节软骨组织MALAT1相对表达水平升高(P＜0.05),miR-146a相对表达水平降低(P＜0.05),MALAT1与miR-146a表达呈负相关(r=-0.907 8,P＜0.001);双荧光素酶报告基因试验显示,miR-146a和MALAT1存在靶向作用关系;相比于IL-1β组,miR-146a组细胞增殖水平降低,细胞凋亡率及cl-CASP3、Bax相对蛋白表达水平升高,Bcl-2相对蛋白表达水平降低,同时MMP-13和ADAMTS-5相对蛋白表达水平升高,COL2和聚蛋白聚糖相对蛋白表达水平降低(均P＜0.01);MALAT1过表达可显著降低miR-146a的表达水平,提高细胞增殖活性并抑制其凋亡,同时降低MMP-13和ADAMTS-5相对蛋白表达水平,提升COL2和聚蛋白聚糖相对蛋白表达水平(均P＜0.01).该研究提示,MALAT1可通过靶向作用于miR-146a发挥对软骨细胞的抗凋亡作用.
其他文献
目的探讨胸腺蛋白肽粉对健康人群人体免疫力的影响。方法10名健康志愿者,年龄24~43岁,服用胸腺蛋白肽粉,一日1次,连续60 d,分别于服用前、服用后第14,30,60天采血检测细胞免疫指标。结果CD4+/CD8+比值、CD4+CD45RA+、CD8+CD45RA+、CD3+HLA-DR+、Treg、Tc、Tn、Tm的水平升高(P&
目的:观察康复训练结合中医药膳营养的协同护理干预对老年人工全髋关节置换术(THR)衰弱的影响,为改善术后患者衰弱程度,制定干预措施提供循证依据.方法:采用便利抽样法,选取2
目的建立气相色谱法测定十六醇中十四醇、十五醇、十七醇、十八醇含量的方法。方法采用气相色谱法,色谱柱为Agilent DB-5毛细管柱(30 m×0.32 mm,0.5μm),柱温采用程序升温法;进样口温度270℃,分流比30:1;氢火焰离子化检测器温度330℃;流速1.5 ml/min。结果十四醇、十五醇、十六醇、十七醇、十八醇浓度分别在9.955~397.880μg/ml,9.624~385.016μg/ml,0.008~80.292 mg/ml,15.747~393.354μg/ml,15.969~3
目的 建立同时测定丁细牙痛胶囊中丁香酚、甲基丁香酚、黄樟醚及异丁香酚4种成分含量的方法.方法 采用气相色谱法,色谱柱为HP-1301毛细管柱,程序升温,检测器为氢火焰离子化检
维生素D属固醇类衍生物,是维持人体生命稳定的一种营养素.活性维生素D通过与维生素D受体(vitamin D receptor,VDR)结合而发挥生物学效应.自VDR和1α-羟化酶(cytochrome P450
伯氏疏螺旋体补体调节因子捕获表面蛋白(complement regulator-acquiring surface protein,CRASP)通过捕获宿主补体调节因子,干扰补体激活机制,防止螺旋体在宿主体内定植过程
非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)是一类不具有编码蛋白质功能的基因组转录产物,其具有复杂的生物学功能,广泛参与人体生理、病理活动的调控.近来研究发现,ncRNA的表达失调与
为探究紫杉醇联合他莫昔芬对人乳腺癌细胞的影响并初步研究其作用机制,体外培养人乳腺癌细胞MCF-7,MTT法检测紫杉醇、他莫昔芬单独及联合使用对MCF-7细胞株的增殖抑制作用,计
目的 建立测定大鼠血浆中丹参酮IIA磺酸钠浓度的LC-MS/MS方法,并用于毒代动力学研究.方法 30只大鼠随机分为低[10 mg/(kg·d)-1]、中[20 mg/(kg·d)-1]、高[40 mg/(kg·d)-1]
为探讨利用广谱组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase,HDAC)抑制剂曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)调控骨髓(bone marrow,BM)细胞分化、发育及炎性因子转录,体外诱导BM细胞